Пцр на вич качественный

Содержание
  1. Как сдать анализы на ВИЧ ПЦР?
  2. Диагностика инфекции ВИЧ
  3. Суть анализа
  4. Стоимость исследования
  5. Подготовка к анализу
  6. Плюсы ПЦР при ВИЧ
  7. Минусы метода
  8. Длительность анализа
  9. Когда берут кровь на анализ?
  10. Пцр или ифа, что лучше?
  11. Качественный анализ на ВИЧ
  12. Количественный анализ на ВИЧ
  13. Как сдается анализ ПЦР на ВИЧ-инфекцию
  14. Как ПЦР работает при диагностике ВИЧ-инфекции
  15. Кому и в каких случаях проводится диагностика
  16. Как сдаётся анализ
  17. Подготовка пациента
  18. Взятие материала
  19. Расшифровка результатов
  20. Сколько времени делается анализ
  21. Показатели качественного анализа
  22. Количественное исследование
  23. Генотипирование
  24. Может ли результат быть ложноположительным
  25. Через сколько времени после заражения можно обнаружить ВИЧ
  26. Анализы методом ПЦР
  27. Основы ПЦР
  28. Пцр в диагностике инфекционных болезней
  29. ПЦР-диагностика гепатитов
  30. Пцр в диагностике вич-инфекции
  31. Где сдать анализы ПЦР?
  32. Анализ на ВИЧ с помощью метода ПЦР: когда сдавать, какая точность
  33. Суть методики ПЦР при ВИЧ
  34. Преимущества и недостатки методики ПЦР при ВИЧ
  35. Кому проводится ПЦР
  36. Сколько времени делается анализ ПЦР, и где можно сдать
  37. Кому проводится ПЦР?
  38. Сколько времени делается анализ ПЦР, и где можно сдать?

Как сдать анализы на ВИЧ ПЦР?

Пцр на вич качественный

Согласно статистике ВОЗ, за 40 последних лет 25 млн человек умерли от СПИДа. Урон от этой инфекции колоссален. Больше всего зараженных оказалось в странах Африки, откуда и пошла эта инфекция. При ВИЧ становится особо актуальной диагностика заболевания. Правда, средств для лечения ВИЧ еще не создано, но рано начатая терапия может удлинить срок жизни пациента и улучшить ее качество.

Диагностика инфекции ВИЧ

ВИЧ-инфекция определяется на разных этапах следующими методами:

  • ИФА – иммуноферментный анализ.
  • Вестерн-блот.
  • ПЦР – полимеразная цепная реакция.
  • Экспресс-тесты.

Метод ПЦР был разработан американским биохимиком Кэри Муллисом, который получил за это в 1983 году Нобелевскую премию. Сегодня этот метод в медицине при диагностике всех инфекций считается ведущим в силу своей точности и информативности. ВИЧ в этом плане не исключение.

Суть анализа

Любая живая клетка содержит РНК и ДНК. Эти нуклеиновые кислоты способны к самокопированию и самовоспроизведению. Для каждой инфекции фрагменты ДНК уникальны. В биологических жидкостях эти обломки нуклеиновых кислот циркулируют.

Они улавливаются и распознаются специальной аппаратурой – реактором. Это и есть основа метода. Лаборант ведет подсчет этих фрагментов. У ретровируса ВИЧ отслеживают РНК.

Даже при единичных копиях вирусных частиц ПЦР может их обнаружить и посчитать.

В качестве исследуемой жидкости чаще всего используется венозная кровь. Специальные компоненты метода вступают в связь с частицами вируса и делают их определяемыми, потому что происходит многократное увеличение найденных фрагментов.

В случае с ВИЧ результат наличия вируса можно получить задолго до того, как появится клиника. Поэтому в силу своей высокой чувствительности ПЦР имеет такое высокое диагностическое значение. Огромный плюс ПЦР заключается в универсальности метода. Инкубационный период инфекции для ПЦР не преграда.

Стоимость исследования

Метод ПЦР – достаточно дорогой. В этом заключается один из его больших минусов. Для его проведения нужна новейшая аппаратура и высокая квалификация врача-лаборанта. В силу сказанного ПЦР-диагностика не выполняется в небольших населенных пунктах. Сдать анализ можно только в специализированных крупных клиниках.

Стоимость определения ДНК ВИЧ в клиниках Москвы от 2 800 рублей, выяснение с помощью ПЦР вирусной нагрузки (РНК вируса в плазме) – от 8 800 рублей, а резистентности ВИЧ к ингибиторам протеазы – от 16 500 рублей. Как видим, цены достаточно высокие.

ПЦР можно провести бесплатно в государственных поликлиниках по полису ОМС. Важно, что процедуру можно сделать анонимно. В регистратуре пациент получает номер, по которому он сможет узнать результат.

В современных медцентрах имеются личные кабинеты клиентов, куда эти данные будут внесены.

ПЦР-диагностику на ВИЧ назначают в таких случаях:

  • Выявление инфекции у ребенка, рожденного от больной матери или носительницы, чтобы определить внутриутробное инфицирование.
  • Если ИФА дал сомнительные результаты (ПЦР на ВИЧ помогает в этом случае поставить окончательный диагноз).
  • Для выявления количественного содержания вируса в организме.
  • При положительном иммуноблотинге – они с ПЦР дополняют друг друга.
  • Тестирование доноров.
  • Для ранней диагностики ВИЧ.
  • Для определения эффективности и резистентности к АРВТ.

Преимущество указанного анализа и в том, что ПЦР на ВИЧ можно проводить даже детям до года.

Исследование чаще выполняют не для первичной диагностики, а уже в процессе лечения. Первичная диагностика – это серологические исследования (при них определяют уровень антител к ВИЧ). При ложноположительном результате его повторяют – это может быть при низкой вирусной нагрузке.

ПЦР диагностирует ВИЧ, когда еще нет к нему антител. Метод ИФА в этом случае не даст ответа.

А ПЦР на ВИЧ будет уже положительным. Но симптомы данного периода ВИЧ неспецифичны. Пациент сначала долго и безуспешно лечится по поводу ОРВИ у терапевта. Следует иметь в виду, что диагноз ВИЧ только на основании ПЦР не ставится, необходимо прохождение и других комплексных тестов. Метод ПЦР служит чаще вспомогательным для сложных случаев.

Подготовка к анализу

Перед тем как сдать ПЦР на ВИЧ, за 2 дня до анализа нужно не употреблять жирную пищу, алкоголь. Также лучше психически и физически не напрягаться. Если пациенту назначен курс иммуностимуляции, его прекращают за 2 недели до анализа.

Кровь лучше сдавать в утренние часы. Исследовать можно и другие биологические жидкости организма (сперму, секрет вагины), но лучшим материалом является кровь. Слюну, пот, мочу и слезы не используют, так как содержание вируса в них минимально.

Плюсы ПЦР при ВИЧ

Достоинствами метода являются крайне малая вероятность ложноположительного результата, универсальность реакции для любых биологических жидкостей организма. Анализ имеет широкий спектр:

  • Один забор крови можно использовать для выявления разных инфекций.
  • Методика относится к срочным, результат бывает готов уже на следующий день.
  • Достоверность составляет от 85 до 98%.
  • Наличие ВИЧ можно определить через 10-14 дней после заражения (антител при этом сроке еще нет).
  • Нет возрастных ограничений, проводить можно сразу с момента рождения.

Минусы метода

Недостатки ПЦР заключаются в следующем:

  • Дороговизна анализа.
  • Необходимо сложное медицинское оборудование.
  • Требуется высокая квалификация лаборанта и врача, берущего анализ.
  • Реакция высокочувствительна, поэтому погрешность может составить 20%.
  • Может получиться ложноположительный результат, если у пациента есть аутоиммунные процессы, онкология, хронические инфекции.
  • Необходима особая чистота помещения лаборатории, потому что вирус может попасть в анализ из воздуха. Тогда результат будет неправильным.

Для лабораторий, в которых проводится ПЦР, для улучшения качества диагностики разработаны специальные жесткие меры по системе СанПиНа на внутренний контроль. Кроме того, должны быть соблюдены все правила работы при такой методике:

  • Требуется строго следить на информацией на пробирках.
  • Перед забором крови вновь посмотреть и удостовериться в назначении анализа.
  • Медсестра должна сделать правильную маркировку пробирок.
  • Врач-лаборант должен правильно провести все манипуляции с биоматериалом, чтобы не допустить перекрестное загрязнение.
  • Тест-система должна быть отличного качества.

Только при соблюдении всех этих условий погрешность в ответе может составить всего около 2% эпизодов.

Длительность анализа

Многие интересуются, через сколько ПЦР на ВИЧ будет готов. Диагностирование длится не больше 8 часов. Ответ пациент может получить уже на следующий день. Экспресс-тестирование выполняют в течение 2 часов.

Несмотря на массу преимуществ, ПЦР не считается идеальным методом диагностирования. К нему обращаются в случае необходимости получения скрининговых тестов на наличие ВИЧ в организме.

Когда берут кровь на анализ?

Через сколько сдавать ПЦР на ВИЧ? Достоверный результат можно получить уже при взятии крови через 4-4 дней после предполагаемого инфицирования. Через 2 недели достоверность на ВИЧ составит 98%, а при сроке 5 дней – 80%. Наличие при ПЦР на ВИЧ отрицательного результата будет достоверным, но для абсолютно точного результата проводят и ИФА.

Анализ ИФА будет результативным только при наличии антител к вирусу, это время может занимать от 1-3 месяцев до полугода. Так как ИФА дает вероятность выше (98%-99,9%), ПЦР нельзя назвать 100% подтверждающим анализом на наличие ВИЧ-инфекции. Но зато это единственная методика, при которой не нужно ждать появления антител.

При ВИЧ методом ПЦР можно получить сведения об эффективности АРВТ, о стадии заболевания ВИЧ и количестве ВН (количественная оценка нахождения ВИЧ в организме). Это будет говорить о тяжести и степени изменений.

Сдать анализы на ПЦР при ВИЧ нужно и в том случае, если антитела в крови есть, но их наличие не указывает на достоверность ВИЧ-инфицирования клинически.

Сдают анализ не только при заражении и случайной половой связи. Другие поводы:

  • Планирование беременности.
  • Предстоящая операция.
  • Случайная половая связь.
  • Некоторые профессии требуют сдачи этого анализа для допуска на работу (педагоги, врачи и другой медицинский персонал).
  • Заключенные.
  • Больные ТБ.
  • Работники МЧС и полиции.
  • Вернувшиеся после отпуска из экзотических стран (при желании удостовериться, что нет инфицирования).
  • Проститутки.
  • Иностранные студенты.
  • Наркоманы.

Также к сдаче анализа на ВИЧ может вынудить определенная симптоматика у пациента:

  • Резкая потеря веса.
  • Диарея, длящаяся больше 3 недель.
  • Беспричинное повышение температуры в течение длительного времени.
  • Увеличение лимфоузлов.
  • Невыясненная причина пневмонии, кандидоза и пр.

Расшифровка анализа – прерогатива лечащего врача, а не лаборанта.

Пцр или ифа, что лучше?

При ПЦР-диагностике ВИЧ РНК вируса выявляется и качественно, и количественно. Этот анализ четко идентифицирует конкретный патоген даже при условии наличия нескольких перекрестно реагируемых.

Биологический материал можно использовать даже в засохшем виде.

Минус же в высокой чувствительности ПЦР, когда ложноположительный результат может дать и присутствие на инструментах или пробирке даже мизерного количества постороннего ДНК.

Задача и возможность ИФА – определение наличия антител к ретровирусу. Хотя его точность 99%, на ранних стадиях он неприменим.

Качественный анализ на ВИЧ

Проведение качественного ПЦР на ВИЧ определяет присутствие вируса в организме. Результаты в этом случае будут выглядеть следующим образом: положительный, ложноположительный, отрицательный. Но данное исследование не даст сведений о количестве ретровируса. Такой качественный анализ нецелесообразен тогда, когда уже выявлена ВИЧ-инфекция в организме другими способами.

Контролировать результативность лечения качественным ПЦР невозможно.

Количественный анализ на ВИЧ

Проводится уже только ВИЧ-инфицированным с целью подсчета количества копий РНК вируса в биопрепарате.

Цель такого исследования – мониторинг проводимого лечения и выявление резистентности вируса к нему. Противовирусная терапия в таких вычислениях не назначается врачом вслепую, поэтому будет являться более эффективной. Количественный ПЦР на ВИЧ-инфекцию делают гораздо чаще. Отображается этот анализ копией/мл крови.

Какие результаты могут быть выданы:

  • РНК вируса отсутствует или его очень мало (около 20 копий/мл). Нет достоверности диагноза.
  • От 20 – до 10 в 6 степени копий/мл – диагноз достоверный.
  • Более чем 10 в 6 степени копий/мл – большая ВН.

Лаборатории могут выполнять анализ ПЦР на ВИЧ в режиме Real-time. Это подразумевает наблюдение и численную оценку накапливания продуктов ПЦР при автоматической фиксации результатов.

Источник: https://FB.ru/article/440513/kak-sdat-analizyi-na-vich-ptsr

Как сдается анализ ПЦР на ВИЧ-инфекцию

Пцр на вич качественный

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) справедливо называют эпидемией 21-й века, поскольку ежедневно в мире заражается 7000 человек, и 5400 инфицированных умирает от осложнений этой инфекции.

Каждый житель планеты имеет ВИЧ-статус: у кого-то он отрицательный, а у кого-то – положительный. Определение статуса относительно вируса иммунодефицита человека проводят с помощью количественных и качественных тестов.

Наиболее точно наличие возбудителя в организме показывает ПЦР на ВИЧ.

Как ПЦР работает при диагностике ВИЧ-инфекции

Принцип действия полимеразной цепной реакции достаточно сложный. Это метод молекулярной генетики, позволяющий анализировать любую короткую последовательность ДНК или РНК. Это можно осуществлять даже в образцах биологического материала, содержащих минимальное количество искомых патогенных возбудителей. Более простым языком ПЦР при ВИЧ можно объяснить так:

  • каждый вирус, в том числе и вирус иммунодефицита, содержит геном, закодированный в ДНК или РНК определенным набором нуклеотидов, которые образуют две параллельные спиралевидные цепи, соединённые между собой;
  • в ходе многочисленных исследований учёным удалось выделить и воспроизвести участок РНК вируса иммунодефицита человека;
  • во время проведения ПЦР происходит многоразовое копирование генома материала при температуре реагента 94 градуса Цельсия, после чего полученную РНК сравнивают с эталонной РНК вируса.

По окончании анализа амплификатор выдаёт результат – отрицательный, то есть геном вируса иммунодефицита в исследуемом материале отсутствует, или положительный, когда выявлена частица РНК вируса ВИЧ.

ПЦР является одновременно и качественным, и количественным анализом крови, поскольку определяет наличие вируса и его концентрацию, что важно для мониторинга антиретровирусной терапии.

Кому и в каких случаях проводится диагностика

Полимеразная цепная реакция не принадлежит к скрининговым методам диагностики болезни, а используется для подтверждения диагноза у лиц с подозрением на инфицирование. Тестирование показано в следующих ситуациях.

  • Положительная или слабоположительная реакция анализа ИФА. Выявление антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа – это скрининговый метод диагностики ВИЧ, который проводят лицам из групп риска, а также всем желающим определить свой ВИЧ-статус. Все положительные и слабоположительные ИФА-тесты проходят повторную диагностику путём ПЦР.
  • Неоднозначная интерпретация скрининговых тестов на ВИЧ. Для скрининга используют ИФА, после чего материал дообследуют методом иммуноблотинга. Ситуация, когда результаты этих тестов различаются, требует проведения ПЦР.
  • Исследование крови от доноров с целью профилактики распространения ВИЧ. Гемоматериал проверяют одновременно методами ИФА и ПЦР, поскольку при недавнем заражении антитела к вирусу иммунодефицита могут ещё не сформироваться.
  • Тестирование крови новорождённых от матерей, больных СПИДом. Поскольку у женщин с положительным ВИЧ-статусом в крови циркулируют антитела против возбудителя, то и у новорождённого также будут обнаруживаться эти иммуноглобулины. Тест ИФА будет положительным всегда, но это не будет говорить о том, что ребёнок инфицированный. Поэтому всем детям, которые были рождены от матерей, больных СПИДом, проводят ПЦР. Достоверность исследования составляет 99 %. Учитывая риск ложноотрицательного результата, первую ПЦР выполняют ребёнку в возрасте один месяц, а вторую – в четыре месяца. Но даже при двух отрицательных тестах на ВИЧ обязательно проводят ИФА в 12 месяцев, чтобы удостовериться в том, что иммуноглобулины матери исчезли из кровяного русла. Если ИФА в год положительная, то контрольное исследование делают через 6 месяцев.
  • Острый период ВИЧ-инфекции. В этом периоде заболевание маскируется под ОРВИ и моноцитарную ангину, но симптомы беспокоят пациента на протяжении нескольких недель. Признаками, которые также должны насторожить, являются отсутствие ринита и лимфаденопатия нескольких групп лимфатических коллекторов. Симптомы появляются через 3-4 недели после заражения, и антитела к патогену ещё не успевают синтезироваться, поэтому используют метод ПЦР, чтобы идентифицировать РНК ВИЧ.
  • Факт контакта медработника с биологическим материалом пациента с ВИЧ. В данном случае показана химиопрофилактика антиретровирусными препаратами, поэтому необходимо определить сразу после контакта, произошло ли инфицирование медработника или нет.
  • Дифференциальная диагностика ВИЧ 1-го и 2-го типов. ВИЧ 1-го типа более агрессивен и быстрее распространяется, поэтому пациентам с положительным ВИЧ-статусом назначают тест ПЦР с целью идентификации типа возбудителя. Хотя у многих больных одновременно обнаруживают оба типа патогена.

Независимо от ситуации, ПЦР назначается врачом-инфекционистом. Также можно пройти тестирование в частной клинике по собственному желанию, причём анонимно.

Как сдаётся анализ

Для диагностики на ВИЧ/СПИД методом ПЦР используют венозную кровь. Тестирование проводят как в государственном учреждении, которое принято называть СПИД-центром, так и частных клиниках.

Если вы подозреваете, что могли заразиться вирусом иммунодефицита человека, то можете пройти диагностику методом ПЦР. Для этого необходимо обратиться в областной СПИД-центр, где исследование будет бесплатным. В частной лаборатории тестирование платное, но результаты будут готовы быстрее.

На забор крови нужно прийти с документами, удостоверяющими личность (паспорт, свидетельство о рождении и тому подобные).

Подготовка пациента

ПЦР-диагностика при ВИЧ не требует какой-либо специальной подготовки. Необходимо только прийти в лабораторию натощак, за два дня до забора материала ограничить физические нагрузки, отказаться от спиртных напитков и не курить за два часа до исследования.

За две недели до тестирования нужно прекратить приём медицинских препаратов, если же это невозможно, то следует предупредить о ситуации врача-лаборанта, который будет интерпретировать результаты ПЦР.

Взятие материала

Забор крови проводят из вены, расположенной в локтевой ямке, с помощью специальной вакуумной стерильной пробирки с иглой. Процедура состоит из следующих этапов:

  • медицинская сестра обрабатывает кожу внутренней поверхности локтевого изгиба 96-процентным этанолом;
  • на среднюю треть плеча накладывают жгут;
  • иглу вводят в вену, и когда начинает поступать кровь, ослабляют жгут;
  • для ПЦР набирают 3-5 мл крови;
  • после забора материала к месту инъекции прикладывают ватный тампон, просят согнуть руку в локтевом суставе.

После процедуры пациенту присваивается номер, пробирка направляется в лабораторию для проведения ПЦР.

Расшифровка результатов

Интерпретация анализов ПЦР проводится непосредственно в лаборатории врачом лабораторной диагностики. Результат выдаётся лично пациенту при предъявлении документов, подтверждающих его личность.

Сколько времени делается анализ

Тестирование крови на ВИЧ с помощью полимеразной цепной реакции длится около шести часов. Результат в государственных лабораториях можно ждать от трёх дней до одной недели, а в частных лабораторных центрах – на 2-й…3-й дни после забора крови.

В некоторых лабораториях можно узнать расшифровку теста в день забора крови, но для этого необходимо доплатить за срочность.

Показатели качественного анализа

Результат качественного ПЦР позволяет определять присутствие или отсутствие в организме вируса иммунодефицита человека. Но оценить вирусную нагрузку с помощью этого теста нельзя. Поэтому качественный ПЦР подходит только для верификации диагноза ВИЧ, но не для мониторинга антиретровирусной терапии.

В заключении тестирования на ВИЧ качественным методом ПЦР можно увидеть три варианта результатов.

  1. Отрицательный – РНК возбудителя не обнаружено.
  2. Положительный – обнаружено геном ВИЧ.
  3. Концентрация РНК ниже порога чувствительности тест-системы.

Количественное исследование

С помощью количественной полимеразной цепной реакции удаётся определить вирусную нагрузку, то есть концентрацию ВИЧ в крови больного. Показанием к проведению данного вида исследования являются:

  • оценка тяжести патологического процесса в организме;
  • мониторинг противовирусного лечения;
  • определение эффективности терапии.

Результаты количественного ПЦР могут быть следующими:

  • 0, то есть РНК вируса в крови пациента не выявлено;
  • 10 тысяч копий на миллилитр – низкая вирусная нагрузка;
  • 20 тысяч копий на миллилитр – показана антиретровирусная терапия;
  • больше 100 тысяч копий на миллилитр – высокий уровень вирусной нагрузки.

Генотипирование

Метод генотипирования ПЦР определяет, каким именно типом ВИЧ произошло инфицирование. Вирус иммунодефицита первого и второго типов имеют схожую клиническую картину, но первый тип ВИЧ более агрессивен, быстро прогрессирует и вызывает осложнения.

Может ли результат быть ложноположительным

Как и любое другое исследование, анализ крови на ВИЧ методом ПЦР может давать ложноположительные результаты. Погрешность тестирования составляет 1-2 %, в зависимости от тест-системы. Специалисты это объясняют порогом чувствительности оборудования для проведения полимеразной цепной реакции.

Могут также определяться положительные ошибочные результаты ПЦР, вызванные нарушением техники забора крови, неправильностью проведения тестирования, загрязнением материала заражённой ВИЧ кровью и некачественными тест-системами.

Чтобы избежать лишних стрессов из-за ложноположительного ПЦР, нужно основательно подойти к выбору лаборатории для проведения тестирования – изучить отзывы о клинике, проверить сертификаты на исследование, удостовериться в квалификации медицинского персонала и так далее.

Через сколько времени после заражения можно обнаружить ВИЧ

Чтобы результат ПЦР был максимально точным, тестирование проходят через 14 дней после возможного заражения, поскольку это время необходимо для увеличения концентрации вируса в организме до порога чувствительности тест-системы. Специалисты рекомендуют также пройти повторную диагностику через месяц после первого анализа. Если не соблюдать сроки, то можно получить ложноотрицательный результат.

Анализы методом ПЦР

Пцр на вич качественный

Полимеразную цепную реакцию (Polymerase chain reaction, ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году американский биохимик Кэри Б. Мюллис. В 1993 году за это открытие он был удостоен Нобелевской премии.

Сегодня области применения ПЦР как современного метода молекулярной биологии чрезвычайно широки. Особое место диагностика ПЦР занимает в медицинской практике. И причина этому достаточно проста: полимеразная цепная реакция делает невозможное возможным.

Часто диагностику ПЦР образно описывают как метод, с помощью которого можно находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл. “Иглой” является крошечный фрагмент генетического материала клеток (ДНК или РНК).

Таким образом, открытие этого метода – одно из наиболее выдающихся событий в области молекулярной биологии за последние десятилетия. Развитие метода ПЦР позволило медицинской диагностике в целом подняться на качественно новый уровень.

Основы ПЦР

Основа метода – многократное избирательное копирование (амплификация) определённого участка ДНК с целью получения такого количества генетического материала, которого будет достаточно для визуальной детекции. При этом многократно копируется (амплифицируется) только заданный участок ДНК при условии, что он присутствует в исследуемом биоматериале.

Кроме того, исследование помимо простого увеличения количества копий участков ДНК позволяет проводить другие манипуляции с генетическим материалом. Поэтому метод широко применяется в научных исследованиях, биологической и медицинской практике: в диагностике инфекционных и наследственных заболеваний, при выявлении мутаций, генотипировании, установлении отцовства, идентификация личности и др.

Пцр в диагностике инфекционных болезней

Сегодня ПЦР-диагностика инфекций – один из самых точных, чувствительных и эффективных клинических лабораторных методов. Причём спектр выявляемых возбудителей практически неограничен – была бы разработана тест-система для ПЦР-анализа искомого возбудителя.

Благодаря своей высокой чувствительности, ПЦР позволяет выявить возбудителя даже при его минимальном содержании (то есть в исследуемом биоматериале присутствуют всего несколько молекул его ДНК).

ПЦР выявляет возбудителей инфекционных заболеваний тогда, когда это невозможно сделать другими методами (иммунологическими, культуральными, микроскопическими).

Поэтому для целого ряда возбудителей инфекций метод полимеразной цепной реакции стал «золотым стандартом», он проверен временем и апробирован клинически. В современной лабораторной диагностике инфекционных болезней ПЦР – самый чувствительный и специфичный метод прямого обнаружения возбудителей.

Это позволяет не только установить этиологию заболевания, но и контролировать течение инфекционного процесса и оценивать эффективность проводимого лечения.

Анализ на ИППП методом ПЦР особенно актуальны при бессимптомном течении инфекционного процесса, вызванного безусловно-патогенными микроорганизмами (Хламидия , качественное определение ДНК; Микоплазма, качественное определение ДНК; Возбудитель гонореи, качественное определение ДНК;  Возбудитель трихомоноза, качественное определение ДНК). Например, при хронической гонорее у женщин даже с помощью бактериологического метода часто не удается выявить гонококк, несмотря на имеющиеся симптомы хронического воспалительного процесса в шейке матки или уретре.

Современная ПЦР-диагностика позволяет не только выявить генетический материал возбудителей инфекций, но и определить концентрации их ДНК/РНК (количественный формат исследования).

Определение количества возбудителей имеет важное значение в решении вопроса о назначении лечения, особенно если выявлены условно-патогенные микроорганизмы (Микоплазма, количественное определение ДНК; Типирование уреаплазмы, количественное определение ДНК) .

Одним из основных направлений развития метода ПЦР является разработанный в CMD формат «Мультипрайм», позволяющий выявить в одной пробирке (и одной реакции) нескольких патогенов.

ПЦР-диагностика гепатитов

В настоящее время известно как минимум 5 вирусов, способность которых вызывать поражение печени доказана. Это возбудители гепатита А, В, С, D, Е. В редких случаях гепатит может быть вызван вирусами Эпштейна-Барр и простого герпеса.

Способность поражать печень таких агентов как вирусы ТТ и гепатита G сегодня признается не всеми.

Все эти вирусы относятся к различным семействам, имеют разные биологические свойства и соответственно, тактика лечения будет тоже значительно отличаться в зависимости от этиологии гепатита.

Учитывая вышеизложенное, весьма актуальной проблемой является адекватная этиологическая диагностика вирусных гепатитов с выявлением конкретного возбудителя.

Без использования современных молекулярно-биологических методов это невозможно.

Поэтому диагностика гепатитов методом полимеразной цепной реакции – один из самых важнейших шагов в установлении причины заболевания и определения дальнейшей тактики лечения.

Пцр в диагностике вич-инфекции

В настоящее время для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции используется наиболее доступный и одновременно чувствительный подход – обнаружение в крови антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) – с последующим подтверждением положительных результатов анализа методом иммуноблоттинга (ИБ). Эффективность выявления лиц, инфицированных ВИЧ, с помощью данного подхода может достигать 99% и более.

Но серологическая диагностика ВИЧ-инфекции имеет ряд ограничений:

  1. Неэффективность в период т.н. «серологического окна» (в первые недели после заражения антитела не выявляются по причине их отсутствия или низкой концентрации).
  2. Антитела к ВИЧ длительное время выявляются у всех детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей.
  3. Ложноположительные результаты ИФА из-за присутствия в крови антител к антигенам, сходным с антигенами ВИЧ.
  4. Ложноотрицательные и сомнительные результаты ИФА и иммуноблоттинга (особенно у пациентов в терминальной стадии заболевания).

Поэтому анализы ПЦР при обследовании на ВИЧ-инфекцию сегодня находят всё более широкое применение. Согласно «Методическим рекомендациям о проведении обследования на ВИЧ-инфекцию» (утв. Минздравсоцразвития РФ 06.08.

2007) «при наличии эпидемиологических критериев, свидетельствующих о недавнем риске заражения ВИЧ для пациентов и при этом предположительно ложноположительных или ложноотрицательных результатов в ИФА и ИБ, например, при обследовании детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, или пациентов в периоде «серонегативного окна» используется метод ПЦР, при котором обнаруживается генный материал ВИЧ…..». А в случае уже установленного диагноза ВИЧ-инфекции анализ методом ПЦР используется для прогноза, динамического наблюдения и мониторинга проводимой терапии.

В Центре молекулярной диагностики (CMD) можно сдать ПЦР-анализ на ВИЧ анонимно.

Где сдать анализы ПЦР?

Для этого обращайтесь к разделу сайта «Где сдать анализы».

Источник: https://www.cmd-online.ru/analizy-i-tseny/polimeraznaja-cepnaja-reakcija-pcr/

Анализ на ВИЧ с помощью метода ПЦР: когда сдавать, какая точность

Пцр на вич качественный

› Диагностика ВИЧ ›

Способ лечения болезни, вызванной вирусом иммунодефицита человека, не найден до сих пор. Зато диагностика достигла серьезных успехов. Анализ на ВИЧ, выполненный методом ПЦР, – один из вариантов выявления вируса в организме.

Суть методики ПЦР при ВИЧ

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, – один из современных методов диагностики ВИЧ. В его основе лежит способность нуклеиновых кислот к саморепродукции. Клетка любого живого организма включает белок и нуклеиновые кислоты:

  • РНК- рибонуклеиновую,
  • ДНК- дезоксирибонуклеиновую.

Эти макромолекулы хранят генетический код. Если концентрация вирусных клеток в крови низкая, в пробе содержатся не целые цепочки ДНК, а их отдельные «кирпичики» – нуклеотиды.

Полимеразная цепная реакция выявляет даже такие «обломки» вирусных клеток.

Этот анализ крови на ВИЧ позволяет получить результат на ранних сроках после возможного заражения, когда клинические первые симптомы еще не появились.

Наиболее точный результат можно получить, используя для анализа венозную кровь. Перед тем как пройти обследование, за пару дней следует отказаться от жирной пищи и алкоголя. За 2 недели прекратить прием иммуностимулирующих препаратов.

Пробу биоматериала расщепляют в медицинском лабораторном реакторе. Затем фракции обрабатывают ферментами. Реактивы объединяются с ДНК вирусной молекулы и дублируют ее. Из одной клетки получается 2, из 2-х – 4, далее 8. Число растет в геометрической прогрессии. Цепная реакция позволяет в короткий срок увеличить количество вирусного компонента и сделать его заметным для лаборантов.

Нормой является отрицательный результат анализа, который выглядит так: «ДНК вируса не обнаружено». Это и есть референсное (среднестатистическое) значение.

Преимущества и недостатки методики ПЦР при ВИЧ

Диагностика ВИЧ с помощью ПЦР имеет неоспоримые преимущества, но есть и существенные недостатки. К первым относятся:

  • Высокая точность. Крайне мала вероятность получить ложноотрицательные результаты.
  • Универсальность. Для исследования подходит не только кровь, но и другие биологические жидкости (влагалищные выделения, сперма). Слюна, моча также используются, но точность результата будет ниже. В этих средах концентрация вирусных клеток незначительна.
  • Широкий спектр анализа. Один образец биоматериала можно исследовать на несколько заболеваний.
  • Скорость выполнения. Полимеразная цепная реакция относится к срочным методам диагностики. Ответ можно узнать уже на следующий день.
  • Достоверность составляет 80 %. С помощью метода ПЦР можно обнаружить вирусные частицы, даже если их концентрация невелика. Это позволяет диагностировать заболевание на ранних стадиях и своевременно начинать терапию.
  • Ранняя диагностика ВИЧ-инфекции. Время, когда ВИЧ обнаруживают в крови при помощи ПЦР, – 10-14 дней после предполагаемого заражения. Это стандартный отрезок для диагностики вируса иммунодефицита. Антитела на этом этапе еще не обнаруживаются; метод ИФА не работает.
  • Нет возрастных ограничений. Можно проводить это тестирование ребенку с момента рождения.

Недостатки метода ПЦР при диагностике ВИЧ:

  • Более высокая стоимость в сравнении с иммуноферментным анализом 3 поколения.
  • Требуется сложное медицинское оборудование.
  • Погрешность 20%  в связи с высокой чувствительностью реакции. При аутоиммунных заболеваниях, злокачественных опухолях, хронических инфекциях ПЦР может дать ложноположительный результат.

Кому проводится ПЦР

Проведение этого анализа на ВИЧ рекомендовано в следующих случаях:

  • Нужен ранний ответ для предварительного диагностирования. ПЦР помогает подтвердить или опровергнуть результаты ИФА.
  • Иммуноблоттинг дал положительный результат. Если первым проводится ПЦР анализ, то обязательно подтверждение результата методом иммунного блоттинга. Исследования дополняют друг друга. Используя сразу 2 метода, медики исключают возможность ошибок.
  • Когда позитивный ВИЧ-статус подтвержден, ПЦР помогает отследить эффективность проводимой терапии.
  • Используется для исследования донорской крови на наличие антител к ВИЧ.
  • Проводить ПЦР можно даже детям до года. Этот метод применяется, чтобы выяснить ВИЧ-статус новорожденных, мамы которых являются носительницами вируса. Тест, проведенный в первые дни жизни, покажет, произошло ли внутриутробное инфицирование. Заражение могло случиться, когда ребенок проходил по родовым путям. Положительный ВИЧ-статус, приобретенный младенцем в процессе родов, удастся выявить через 2 – 3 недели.

Сколько времени делается анализ ПЦР, и где можно сдать

Проведение анализа ПЦР на ВИЧ и расшифровка результатов не требуют много времени. Забор крови занимает 5-7 минут. В стандартном случае лаборанту достаточно 24 часов, чтобы подготовить справку. Диагностирование занимает не более 8 часов, остальное время требуется на оформление. Пациент получает отчет на следующий рабочий день. Экспресс-тестирование выполняют в течение 2 часов.

Исследования на ВИЧ указанным способом не проводят по полису ОМС. Получить эту услугу бесплатно в государственной поликлинике нельзя. Зато практически все коммерческие лаборатории обычно имеют необходимое оборудование и реагенты. Проведение анализа ПЦР часто входит в общий скрининг на ВИЧ. Цена комплексной диагностики составляет от 600 до 1000 руб.

Пройти процедуру можно анонимно. В регистратуре пациенту дают индивидуальный номер, по которому он узнает результат. Современные медицинские центры отображают все данные на своем сайте в личном кабинете клиента.

Анализ на ВИЧ с помощью метода ПЦР: когда сдавать, какая точностьСсылка на основную публикацию

Источник: https://aids24.ru/diagnostika-vich/analiz-na-vich-metod-ptsr

Кому проводится ПЦР?

Основные области применения ПЦР:

1. Тестированиедонорской крови на ВИЧ. Её проверяют и с помощью серологических тестов. Ноте могут дать ложноотрицательный результат, если инфицирование произошлонедавно. Поэтому кровь дополнительно обследуется методом ПЦР для выявлениявирусной РНК – самого раннего маркера инфекции.

2. Первичнаядиагностика ВИЧ у новорожденных. Обычно для первичной диагностикиВИЧ-инфекции используют серологические тесты.

Но в случае обследованияноворожденных они не будут эффективными. Раз пациенту назначены анализы, этоозначает, что он родился от ВИЧ-инфицированной матери. В её крови есть антителак вирусу иммунодефицита.

Это означает, что они будут обнаруживаться и в кровиребенка.

Таким образом, при обследовании всех детей, рожденных отВИЧ-позитивных матерей, будут получены положительные результаты ИФА. Но это неозначает, что передача инфекции произошла. Ведь организм ребенка вполне может ине продуцировать собственных антител.

Диагноз можно подтвердить и с помощью серологическихметодов. О ВИЧ-инфекции говорит более высокая концентрация антител в кровиребенка, чем у матери, а также возрастание титра в динамике (если этоматеринские антитела, то их уровень должен со временем снижаться, а неувеличиваться).

В качестве альтернативного теста используется ПЦР.Обнаружение вирусной РНК тоже считается подтверждением присутствия вирусаиммунодефицита.

Специфичность теста составляет 99% (риск ложноположительногорезультата не превышает 1%). Но чувствительность ниже – около 96%.

Поэтомутребуется два исследования: первое проводится через месяц после родов, а второе– через 3 месяца (в этом возрасте чувствительность ПЦР достигает 100%).

Даже при двух отрицательных результатах ПЦР, нужно подтвердитьисчезновение из крови материнских антител при помощи ИФА. Поэтому анализысдаются в возрасте 1 год. Если положительная реакция сохраняется, то контрольпроводится в полтора года.

3. Слабоположительнаяреакция. ИФА на ВИЧ является скрининговым тестом. Его результатыподтверждаются при помощи иммуноблота. Но это исследование иногда даетсомнительные результаты.

В таких ситуациях стандартный алгоритм диагностикипредполагает дополнительное тестирование таких пациентов через несколькомесяцев.

Но бывает, что результаты снова оказываются сомнительными илислабоположительными.

Самой частой причиной сомнительных результатов являетсянедавнее инфицирование пациента. Но он также может быть следствием другойинфекции. Чтобы точно узнать, имеется ли у человека ВИЧ, можно выполнить ПЦР.Этот метод покажет точный результат уже после первого случая полученияслабоположительной реакции.

4. Острыйретровирусный синдром. В большинстве случаев по своим клиническимпроявлениям ничем не отличается от гриппа или инфекционного мононуклеоза.Большинство пациентов проходят под диагнозом ОРВИ. Но внимательный врач можетобратить внимание на длительную лихорадку, тяжелое течение инфекции, отсутствиенасморка и увеличение сразу нескольких групп лимфоузлов.

Ретровирусный синдром начинается спустя месяц послезаражения. В этот период антител в крови ещё может не быть. Но ПЦР ужестановится положительной. Поэтому именно этот способ диагностики применяют,если есть подозрение, что больной мог заразиться совсем недавно.

5. Противоречивые результатыосновных тестов. Основными тестами является ИФА и иммуноблот. Иногда онипроводятся одновременно, иногда – последовательно.

Положительная реакция ИФАстановится поводом для проведения иммуноблота. Это подтверждающий тест. Если онположительный, ставится диагноз ВИЧ. Но бывает, что подтверждающий тестоказывается отрицательным.

Причин тому может быть две:

  • ложноположительный результат ИФА (бывает в 3-4%случаев);
  • ложноотрицательный результат иммуноблота (обычнов ранний период после заражения).

Разрешить противоречие помогает ПЦР. При отрицательномрезультате ВИЧ исключают, а при положительном – подтверждают. В случаеполучения отрицательного результата желательно повторно сдать анализы через 3месяца, чтобы на 100% удостовериться в отсутствии ВИЧ.

6. Определениепоказаний к экстренной профилактике ВИЧ у медработника. Профилактикаантиретровирусными препаратами показана, только если медработник повредил своюкожу инфицированным материалом.

Иногда неизвестно, инфицирован ли человек, скровью которого произошел контакт.

В таком случае для его обследования лучшепровести ПЦР, чем серологические тесты, так как они дают ложные положительныерезультаты на раннем этапе развития заболевания.

Изредка необходимость в ПЦР возникает, если нужно отличитьВИЧ 1 и 2 типа. Второй тип встречается редко – у 1 из 200 инфицированных.Обычно иммуноблот позволяет провести дифференциальную диагностику. Но иногданаблюдаются случаи перекрестной реактивности, когда антитела к ВИЧ-1взаимодействуют с антигенами ВИЧ-2. Более точным тестом, позволяющим точноопределить тип вируса, является ПЦР.

Сколько времени делается анализ ПЦР, и где можно сдать?

Большинство лабораторий выдают результаты через 2 дняи более с момента взятия биоматериала. Сдать анализ ПЦР на ВИЧ в Москве подоступной цене вы можете в нашем медицинском центре.

Источник: https://ticf.org/novosti/analiz-na-vich-s-pomoshhyu-metoda-ptsr-kogda-sdavat-kakaya-tochnost/

О здоровье
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: